Eppendorf

Клеточные технологии
Микрорассечение
MicroDissector PPMD

Микродиссектор PPMD (микродиссекция при помощи пьезостеппера)

 

Рабочее место для микродиссекции с микроскопом Zeiss Axiovert® 200

 

Принцип действия микродиссектора PPMD

С помощью ультразвукового пьезостеппера приводится в движение тонкий металлический наконечник (MicroChisel) с высокой частотой и малой амплитудой. Все используемые биопрепараты, в том числе, костная и хрящевая ткань, разрезаются быстро и точно. Изоляция клеток, клеточных частиц или клеточных групппроизводится согласно индивидуальной постановке задачи:

При большом объеме клеток рекомендуем применять встроенную в систему электронную заборную трубку и наши капилляры с фильтром Filtertips (MDS).

Для малых групп / отдельных клеток предлагаем вам CellTram vario и стеклянные капилляры TransferTips (MDS) внутр. диам. 20 мкм. Для спец. задач мы изготовим по вашим данным капилляры других размеров. После рассечения микродиссектором PPMD можно выполнять все производные процедуры (напр., РТ-ПЦР или количественный анализ экспрессии мРНК). Очень высокая живучесть изолированных клеток создает оптимальные условия для дальнейшего культивирования и последующих этапов эксперимента.

Область применения

Щадящая микродиссекция клеточных участков и малых клеточных групп, вплоть до отдельных клеток, почти на каждом биологическом материале:

Этапы парафинирования и замораживания почти для всех тканей человека и животных

Можно резать также живую ткань и незафиксированные пробы

Растительный материал

Клеточные культуры (например, стволовые клетки, хрящевые клетки, нейроны, ткань желез)

Характеристики изделий

Гибкая модульная система, состоящая из рассекателя PPMD и заборной трубки с электронным управлением

Быстрая и точная микродиссекция

Все стандартные препараты можно обрабатывать без предварительной обработки

Толщина слоя от нескольких микрон вплоть до макропределов не составляет проблем

Отсутствие деформации материала при нагреве или ультрафиолетовом облучении, возможность изолирования живых клеток и их выращиванияй

Высокое качество производства РНК, ДНК, белков и прочих биомолекул облегчают выполнение последующих задач

 

Рис. 1: Изоляция взрослых агрегатов стволовых клеток из поджелудочной железы 1, 2 Агрегаты стволовых клеток, изолированные микродиссектором PPMD, жизнестойки и имеют большой потенциал дифференцирования. Затем при культивировании можно подтвердить типы клеток всех зародышевых листков. Фото проф.. д-ра К. Крузе, MLU (Институт Медицинской молекулярной биологии Любекского университета)	Рис. 2: Изоляция клеточных участков из препарата ColonMucosa. 4, 5 Фото проф.. д-ра А. Ниендорфа (Medeea Forschungs GmbH, г. Гамбург).

Применение микродиссектора PPMD

Изоляция клеток с высокой жизнеспособностью из всех трех зародышевых культур полипотентных взрослых стволовых клеток (Рис. 1). ^1,2

Изоляция живых хондроцитов, дифференцированных из эмбриональных стволовых клеток. ³

Изоляция клеточных участков из гистологического материала (например, при онкологических исследованиях Рис. 2). ^{4 ,5}

Изоляция мРНК из парафиновых срезов зубов по 6

„Исследование протеомного профиля“ упругих артерий человека. ⁷

Анализ белков, РНК и ДНК из растительного материала. ⁸

Литература:
1 Kruse C,Birth J, Rohwedel K, Assmuth A, Goepel T. Wedel: Pluripotency of adult stem cells derived from human and rat pancreas. Applied Physics A. 2004;10.1007/s0039-004-2816-6.
2 Kruse C, Pavlovic N. The isolation of cellular aggregates from stem cells(Applications No. 49).
3 Rohwedel K, Kruse C. The isolation of living cartilage cells (chondrocytes) (Applicaions No. 48).
4 Harsch M, Bendrat G, Hofmeier D, Branscheid A. Niendorf: A new method for histological microdissection utilizing an ultrasonically oscillating needle- demonstrated by differential mRNA expression in human lung carcinoma tissue. Am J Pathol. 2001;158(6).
5 Niendor A, Harsch A. Isolating cell areas from human lung carcinoma from cryosections (Applications No. 43)
6 McLachlan Jl, smith aJ, Cooper PR. Piezo-power microdissection of mature human dental tissue. Arch Oral Biol. 2003;48.
7 Genero MH, Orti E, Codevilla M, et al. Proteomic profiling of human elastic artery layers dissected with an ultrasonically oscillating metal needle MicroDissector (Abstract from the International Meeting on Proteome Analysis, 2003). Имеется по адресу www.wzw.turn.de/proteomik.
8 Brandt S, Walz C, Schad N, Pavlovic J. Kehr N: A simple, chisel assisted mechanical microdissection system for havesting homogenous plant tissue suitable for the analysis of nucleic acid and proteins. Plant Molec Biol Reporter. 2003;21(4).
9 Verlinden I, Janssens J, Raus J and Michiels L: Microdissection and SAGE as a Combined Tool to Reveal Gene Expression in Ductal Carcinoma In Situ of the Breast (Mol. Carcinogenesis, 41, 2004)

Техническая спецификация

Частота резания	прибл. 25 до мин. 50 кГц, считывание с шагом 0,1 кГц
Амплитуда резания	прибл. 0–1,5 мкм
Объемы пипеток	регулируемые до макс. 40 мл, считывание с шагом 1%, с наконечниками Filtertip MDS используется до макс. 30 мл
Действие пипетки	пошаговое или непрерывное
Потребл. мощность	60 Вт
Размеры	22 x 28 x 11 см
Вес	3,5 кг

Информация для заказа

Обозначение	№ для заказа
Микродиссектор Механич. микродиссектор с ультразвук. пьезошаговым мотором и заборной трубкой с электрон.управлением, с принадлежностями и педалью	5190 000.011
MicroChisel, 10 шт., особо тонкая металлическая игла для микродиссекции	5190 204.008
Filtertips (MDS) стерильн.пипетки с фильтром	5190 043.004
TransferTips® (MDS), 10 шт., стерильн.стекл. капилляры д/забора клеток	5190 042.008
TransferMan® NK 2	5188 000.012
Держатель TwinTip, для TransferMan® NK 2	5188 200.011
CellTram® vario ручной микроинжектор для переноса клеток	5176 000.033